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GB 5009.84-2016

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GB 5009.84-2016 英文版 295 购买 现货,9秒内自动发货PDF,有增值税发票。 食品安全国家标准 食品中维生素B1的测定 有效

   
标准详细信息 GB 5009.84-2016; GB5009.84-2016
中文名称: 食品安全国家标准 食品中维生素B1的测定
英文名称: (Food safety national standard - Determination of Vitamin B1 in Food)
行业: 国家标准
中标分类: X09
字数估计: 10,198
发布日期: 2016-08-31
实施日期: 2017-03-01
旧标准 (被替代): GB/T 9695.27-2008; GB/T 7628-2008; GB/T 5009.84-2003; GB 5413.11-2010
标准依据: 国家卫生和计划生育委员会公告2016年第11号

GB 5009.84-2016
(Food safety national standard - Determination of Vitamin B1 in Food)
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
食品中维生素B1的测定
2016-08-31发布
2017-03-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家卫生和计划生育委员会 发 布
前言
本标准代替GB/T 5009.84-2003《食品中硫胺素(维生素B1)的测定》、GB 5413.11-2010《食品安
全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定》、GB/T7628-2008《谷物中维生素B1的测定》、
GB/T 9695.27-2008《肉与肉制品 维生素B1 含量测定》。
本标准与GB/T 5009.84-2003相比,主要变化如下:
---标准名称修改为“食品安全国家标准食品中维生素B1的测定”;
---增加了高效液相色谱法,作为第一法,将荧光光度法作为第二法;
---修改了检出限的表达,增加了方法的定量限;
---增加了人造沸石预处理中氯离子的定性鉴别方法;
---增加了溴甲酚绿为指示剂时,溶液颜色的变化特征;
---删去了图1(反应瓶)和图2(盐基交换管)结构图;
---增加了人造沸石以湿重表示时的称取量。
食品安全国家标准
食品中维生素B1的测定
1 范围
本标准规定了高效液相色谱法、荧光光度法测定食品中维生素B1 的方法。
本标准适用于食品中维生素B1 含量的测定。
第一法 高效液相色谱法
2 原理
样品在稀盐酸介质中恒温水解、中和,再酶解,水解液用碱性铁氰化钾溶液衍生,正丁醇萃取后,经
C18反相色谱柱分离,用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量。
3 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂
3.1.1 正丁醇(CH3CH2CH2CH2OH)。
3.1.2 铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。
3.1.3 氢氧化钠(NaOH)。
3.1.4 盐酸(HCl)。
3.1.5 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)。
3.1.6 冰乙酸(CH3COOH)。
3.1.7 甲醇(CH3OH):色谱纯。
3.1.8 五氧化二磷(P2O5)或者氯化钙(CaCl2)。
3.1.9 木瓜蛋白酶:应不含维生素B1,酶活力≥800U(活力单位)/mg。
3.1.10 淀粉酶:应不含维生素B1,酶活力≥3700U/g。
3.2 试剂配制
3.2.1 铁氰化钾溶液(20g/L):称取2g铁氰化钾,用水溶解并定容至100mL,摇匀。临用前配制。
3.2.2 氢氧化钠溶液(100g/L):称取25g氢氧化钠,用水溶解并定容至250mL,摇匀。
3.2.3 碱性铁氰化钾溶液:将5mL铁氰化钾溶液与200mL氢氧化钠溶液混合,摇匀。临用前配制。
3.2.4 盐酸溶液(0.1mol/L):移取8.5mL盐酸,加水稀释至1000mL,摇匀。
3.2.5 盐酸溶液(0.01mol/L):量取0.1mol/L盐酸溶液50mL,用水稀释并定容至500mL,摇匀。
3.2.6 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取6.80g乙酸钠,加900mL水溶解,用冰乙酸调pH 为4.0~
5.0之间,加水定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤后使用。
3.2.7 乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.2g乙酸钠,用水溶解并定容至100mL,摇匀。
3.2.8 混合酶溶液:称取1.76g木瓜蛋白酶、1.27g淀粉酶,加水定容至50mL,涡旋,使呈混悬状液体,
冷藏保存。临用前再次摇匀后使用。
3.3 标准品
维生素B1 标准品:盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS·HCl)),CAS:67-03-8,纯度≥99.0%。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 维生素B1 标准储备液(500μg/mL):准确称取经五氧化二磷或者氯化钙干燥24h的盐酸硫胺
素标准品56.1mg(精确至0.1mg),相当于50mg硫胺素、用0.01mol/L盐酸溶液溶解并定容至100
mL,摇匀。置于0℃~4℃冰箱中,保存期为3个月。
3.4.2 维生素B1 标准中间液 (10.0μg/mL):准确移取2.00mL标准储备液,用水稀释并定容至
100mL,摇匀。临用前配制。
3.4.3 维生素B1 标准系列工作液:吸取维生素B1 标准中间液0μL、50.0μL、100μL、200μL、400μL,
800μL,1000μL,用水定容至10mL,标准系列工作液中维生素B1的浓度分别为0μg/mL,0.0500μg/mL,
0.100μg/mL,0.200μg/mL,0.400μg/mL,0.800μg/mL,1.00μg/mL。临用时配制。
4 仪器和设备
4.1 高效液相色谱仪,配置荧光检测器。
4.2 分析天平:感量为0.01g和0.1mg。
4.3 离心机:转速≥4000r/min。
4.4 pH 计:精度0.01。
4.5 组织捣碎机(最大转速不低于10000r/min)。
4.6 电热恒温干燥箱或高压灭菌锅。
5 分析步骤
5.1 试样的制备
5.1.1 液体或固体粉末样品:将样品混合均匀后,立即测定或于冰箱中冷藏。
5.1.2 新鲜水果、蔬菜和肉类:取500g左右样品(肉类取250g),用匀浆机或者粉碎机将样品均质后,
制得均匀性一致的匀浆,立即测定或者于冰箱中冷冻保存。
5.1.3 其他含水量较低的固体样品:如含水量在15%左右的谷物,取100g左右样品,用粉碎机将样品
粉碎后,制得均匀性一致的粉末,立即测定或者于冰箱中冷藏保存。
5.2 试样溶液的制备
称取3g~5g(精确至0.01g)固体试样或者10g~20g液体试样于100mL锥形瓶中(带有软质塞
子),加60mL0.1mol/L盐酸溶液,充分摇匀,塞上软质塞子,高压灭菌锅中121℃保持30min。水解
结束待冷却至40℃以下取出,轻摇数次;用pH计指示,用2.0mol/L乙酸钠溶液调节pH至4.0左右,
加入2.0mL(可根据酶活力不同适当调整用量)混合酶溶液,摇匀后,置于培养箱中37℃过夜(约
16h);将酶解液全部转移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀,离心或者过滤,取上清液备用。
5.2.2 试液衍生化
准确移取上述上清液或者滤液2.0mL于10mL试管中,加入1.0mL碱性铁氰化钾溶液,涡旋混
匀后,准确加入2.0mL正丁醇,再次涡旋混匀1.5min后静置约10min或者离心,待充分分层后,吸取
正丁醇相(上层)经0.45μm有机微孔滤膜过滤,取滤液于2mL棕色进样瓶中,供分析用。若试液中维
另取2.0mL标准系列工作液,与试液同步进行衍生化。
注1:室温条件下衍生产物在4h内稳定。
注2:5.2.1和5.2.2操作过程应在避免强光照射的环境下进行。
注3:辣椒干等样品,提取液直接衍生后测定时,维生素B1 的回收率偏低。提取液经人造沸石净化后,再衍生时维
生素B1 的回收率满足要求。故对于个别特殊样品,当回收率偏低时,样品提取液应净化后再衍生,具体操作
步骤见第二法12.1.3部分。
5.3 仪器参考条件
5.3.1 色谱柱:C18反相色谱柱(粒径5μm,250mm ×4.6mm)或相当者。
5.3.2 流动相:0.05mol/L乙酸钠溶液-甲醇(65+35)。
5.3.4 检测波长:激发波长375nm,发射波长435nm。
5.3.5 进样量:20μL。
5.4 标准曲线的制作
将标准系列工作液衍生物注入高效液相色谱仪中,测定相应的维生素B1 峰面积,以标准工作液的
浓度(μg/mL)为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
5.5 试样溶液的测定
按照5.3的色谱条件,将试样衍生物溶液注入高效液相色谱仪中,得到维生素B1 的峰面积,根据标
准曲线计算得到待测液中维生素B1 的浓度。
6 分析结果的表述
X=
c×V×f
m×1000×
100 (1)
式中:
X ---试样中维生素B1(以硫胺素计)的含量,单位为毫克每百克(mg/100g);
c ---由标准曲线计算得到的试液(提取液)中维生素B1 的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
V ---试液(提取液)的定容体积,单位为毫升(mL);
f ---试液(上清液)衍生前的稀释倍数;
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。
注:试样中测定的硫胺素含量乘以换算系数1.121,即得盐酸硫胺素的含量。
7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
8 其他
当称样量为10.0g时,按照本标准方法的定容体积,食品中维生素B1 的检出限为0.03mg/100g,
定量限为0.10mg/100g。
第二法 荧光分光光度法
9 原理
条件下,以及没有其他荧光物质干扰时,此荧光之强度与噻嘧色素量成正比,即与溶液中硫胺素量成正
比。如试样中含杂质过多,应经过离子交换剂处理,使硫胺素与杂质分离,然后以所得溶液用于测定。
10 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的二级水。
10.1 试剂
10.1.1 正丁醇(CH3CH2CH2CH2OH)。
10.1.2 无水硫酸钠(Na2SO4):560℃烘烤6h后使用。
10.1.3 铁氰化钾[K3Fe(CN)6]。
10.1.4 氢氧化钠(NaOH)。
10.1.6 乙酸钠(CH3COONa·3H2O)。
10.1.7 冰乙酸(CH3COOH)。
10.1.8 人造沸石。
10.1.9 硝酸银(AgNO3)。
10.1.10 溴甲酚绿(C21H14Br4O5S)。
10.1.11 五氧化二磷(P2O5)或者氯化钙(CaCl2)。
10.1.12 氯化钾(KCl)。
10.1.13 淀粉酶:不含维生素B1,酶活力≥3700U/g。
10.1.14 木瓜蛋白酶:不含维生素B1,酶活力≥800U(活力单位)/mg。
10.2.1 0.1mol/L盐酸溶液:移取8.5mL盐酸,用水稀释并定容至1000mL,摇匀。
10.2.2 0.01mol/L盐酸溶液:量取0.1mol/L盐酸溶液50mL,用水稀释并定容至500mL,摇匀。
10.2.3 2mol/L乙酸钠溶液:称取272g乙酸钠,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。
10.2.4 混合酶液:配制同3.2.8。
10.2.5 氯化钾溶液(250g/L):称取250g氯化钾,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。
10.2.6 酸性氯化钾(250g/L):移取8.5mL盐酸,用250g/L氯化钾溶液稀释并定容至1000mL,
摇匀。
10.2.7 氢氧化钠溶液(150g/L):称取150g氢氧化钠,用水溶解并定容至1000mL,摇匀。
10.2.8 铁氰化钾溶液(10g/L):称取1g铁氰化钾,用水溶解并定容至100mL,摇匀,于棕色瓶内
10.2.9 碱性铁氰化钾溶液:移取4mL10g/L铁氰化钾溶液(10.2.8),用150g/L氢氧化钠溶液稀释
至60mL,摇匀。用时现配,避光使用。
10.2.10 乙酸溶液:量取30mL冰乙酸,用水稀释并定容至1000mL,摇匀。
10.2.11 0.01mol/L硝酸银溶液:称取0.17g硝酸银,用100mL水溶解后,于棕色瓶中保存。
10.2.12 0.1mol/L氢氧化钠溶液:称取0.4g氢氧化钠,用水溶解并定容至100mL,摇匀。
10.2.13 溴甲酚绿溶液(0.4g/L):称取0.1g溴甲酚绿,置于小研钵中,加入1.4mL0.1mol/L氢氧化
钠溶液研磨片刻,再加入少许水继续研磨至完全溶解,用水稀释至250mL。
10.2.14 活性人造沸石:称取200g0.25mm(40目)~0.42mm(60目)的人造沸石于2000mL试剂瓶
中,加入10倍于其体积的接近沸腾的热乙酸溶液,振荡10min,静置后,弃去上清液,再加入热乙酸溶
加入乙酸溶液,振荡10min,倒出上清液;反复洗涤,最后用水洗直至不含氯离子。
氯离子的定性鉴别方法:取1mL上述上清液(洗涤液)于5mL试管中,加入几滴0.01mol/L硝酸
银溶液,振荡,观察是否有浑浊产生,如果有浑浊说明还含有氯离子,继续用水洗涤,直至不含氯离子为
止。将此活性人造沸石于水中冷藏保存备用。使用时,倒入适量于铺有滤纸的漏斗中,沥干水后称取约
8.0g倒入充满水的层析柱中。
10.3 标准品
盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS·HCl),CAS:67-03-8,纯度≥99.0%。
10.4 标准溶液配制
10.4.1 维生素B1 标准储备液(100μg/mL):准确称取经氯化钙或者五氧化二磷干燥24h的盐酸硫胺
1000mL,摇匀。于0℃~4℃冰箱避光保存,保存期为3个月。
10.4.2 维生素B1 标准中间液 (10.0μg/mL):将标准储备液用0.01mol/L盐酸溶液稀释10倍,摇匀,
在冰箱中避光保存。
10.4.3 维生素B1 标准使用液 (0.100μg/mL):准确移取维生素B1 标准中间液1.00mL,用水稀释、定
容至100mL,摇匀。临用前配制。
11 仪器和设备
11.1 荧光分光光度计。
11.2 离心机:转速≥4000r/min。
11.3 pH计:精度0.01。
11.5 盐基交换管或层析柱(60mL,300mm×10mm内径)。
11.6 天平:感量为0.01g和0.01mg。
12 分析步骤
12.1 试样制备
12.1.1 试样预处理
用匀浆机将样品均质成匀浆,于冰箱中冷冻保存,用时将其解冻混匀使用。干燥试样取不少于
150g,将其全部充分粉碎后备用。
12.1.2 提取
准确称取适量试样(估计其硫胺素含量约为10μg~30μg,一般称取2g~10g试样),置于100mL
30min,结束后,凉至室温后取出。用2mol/L乙酸钠溶液调pH为4.0~5.0或者用0.4g/L溴甲酚绿
溶液为指示剂,滴定至溶液由黄色转变为蓝绿色。
酶解:于水解液中加入2mL混合酶液,于45℃~50℃温箱中保温过夜(16h)。待溶液凉至室温
后,转移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀、过滤,即得提取液。
12.1.3 净化
装柱:根据待测样品的数量,取适量处理好的活性人造沸石,经滤纸过滤后,放在烧杯中。用少许脱
脂棉铺于盐基交换管柱(或层析柱)的底部,加水将棉纤维中的气泡排出,关闭柱塞,加入约20mL水,
再加入约8.0g(以湿重计,相当于干重1.0g~1.2g)经预先处理的活性人造沸石,要求保持盐基交换管
中液面始终高过活性人造沸石。活性人造沸石柱床的高度对维生素B1 测定结果有影响,高度不低于
样品提取液的净化:准确加入20mL上述提取液于上述盐基交换管柱(或层析柱)中,使通过活性
人造沸石的硫胺素总量约为2μg~5μg,流速约为1滴/s。加入10mL近沸腾的热水冲洗盐基交换柱,
流速约为1滴/s,弃去淋洗液,如此重复三次。于交换管下放置25mL刻度试管用于收集洗脱液,分两
次加入20mL温度约为90℃的酸性氯化钾溶液,每次10mL,流速为1滴/s。待洗脱液凉至室温后,用
250g/L酸性氯化钾定容,摇匀,即为试样净化液。
标准溶液的处理:重复上述操作,取20mL维生素B1 标准使用液(0.1μg/mL)代替试样提取液,同
上用盐基交换管(或层析柱)净化,即得到标准净化液。
12.1.4 氧化
将5mL试样净化液分别加入A、B两支已标记的50mL离心管中。在避光条件下将3mL150g/L
10mL正丁醇,将A、B管同时涡旋90s。静置分层后吸取上层有机相于另一套离心管中,加入2g~3g
无水硫酸钠,涡旋20s,使溶液充分脱水,待测定。
用标准的净化液代替试样净化液重复12.1.4的操作。
12.2 测定
12.2.1 荧光测定条件
激发波长:365nm;发射波长:435nm;狭缝宽度:5nm。
12.2.2 依次测定下列荧光强度
a) 试样空白荧光强度(试样反应管A);
b) 标准空白荧光强度(标准反应管A);
d) 标准荧光强度(标准反应管B)。
13 分析结果的表述
试样中维生素B1(以硫胺素计)的含量按式(2)计算:
X=
(U-Ub)×c×V
(S-Sb) ×
V1×f
V2×m×
(2)
X ---试样中维生素B1(以硫胺素计)的含量,单位为毫克每100克(mg/100g)。
U ---试样荧光强度;
Ub ---试样空白荧光强度;
S ---标准管荧光强度;
Sb ---标准管空白荧光强度;
c ---硫胺素标准使用液的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
V ---用于净化的硫胺素标准使用液体积,单位为毫升(mL);
V1 ---试样水解后定容得到的提取液之体积,单位为毫升(mL);
V2 ---试样用于净化的提取液体积,单位为毫升(mL);
m ---试样质量,单位为克(g)。
注:试样中测定的硫胺素含量乘以换算系数1.121,即得盐酸硫胺素的含量。
维生素B1 标准在0.2μg~10μg之间呈线性关系,可以用单点法计算结果,否则用标准工作曲线
法。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留三位有效数字。
14 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
15 其他
检出限为0.04mg/100g,定量限为0.12mg/100g。
附 录 A
维生素B1 标准衍生物的HPLC谱图见图A.1。
图A.1 维生素B1 标准衍生物的高效液相色谱图

GB 5009.84-2016
GB
NATIONAL STANDARD OF THE
PEOPLE’S REPUBLIC OF CHINA
National food safety standard -
Determination of vitamin B1 in foods
食品安全国家标准
食品中维生素 B1的测定
ISSUED ON. AUGUST 31, 2016
IMPLEMENTED ON. MARCH 01, 2017
Issued by. National Health and Family Planning Commission of the
People's Republic of China
Table of Contents
Foreword ... 3 
1 Scope ... 4 
2 Principles ... 4 
3 Reagents and materials ... 4 
4 Instruments and equipment ... 6 
5 Analytical procedures ... 6 
6 Expression of analytical results ... 8 
7 Precision... 9 
8 Others ... 9 
9 Principles ... 9 
10 Reagents and materials... 10 
11 Instruments and equipment ... 12 
12 Analytical procedures ... 13 
13 Expression of analytical results ... 15 
14 Precision ... 16 
15 Others ... 16 
Appendix A High performance liquid chromatogram of vitamin B1 standard
derivatives ... 17 
Foreword
This standard replaces GB/T 5009.84-2003 “Determination of thiamine (vitamin
B1) in foods”, GB 5413.11-2010 “National food safety standard - Determination
of vitamin B1 in foods for infants and young children, milk and milk products”,
GB/T 7628- 2008 “Determination of vitamin B1 in cereals”, GB/T 9695.27-2008
“Meat and meat products - Determination of vitamin B1 content”.
As compared with GB/T 5009.84-2003, the main changes of this standard are
as follows.
- CHANGE the standard name into “National food safety standard -
Determination of Vitamin B1 in foods”;
- ADD the high performance liquid chromatography as the first method, USE
the fluorescence spectrophotometry as the second method;
- MODIFY the expression of detection limit, ADD the quantitative limits of
method;
- ADD the qualitative identification method of chloride ion in the artificial
zeolite pretreatment;
- ADD the color change characteristics of the solution when using the
bromocresol green as the indicator;
- DELETE the Figure 1 (reaction bottle) and Figure 2 (base salt exchange
tube) structure;
- ADD the weighing amount of artificial zeolite when it is expressed in wet
weight.
National food safety standard -
Determination of vitamin B1 in foods
1 Scope
This standard specifies the method for determining the vitamin B1 in foods by
the high performance liquid chromatography and fluorescence
spectrophotometry.
This standard applies to the determination of vitamin B1 content in food.
Method 1. High performance liquid chromatography
2 Principles
Samples are hydrolyzed, neutralized, then rehydrated in dilute hydrochloric acid
medium at constant temperature. The hydrolyzate is derivatized by alkaline
potassium ferricyanide solution, extracted with n-butanol, separated by C18
reversed-phase column, detected by high performance liquid chromatography-
fluorescence detector, quantified by external standard method.
3 Reagents and materials
Unless otherwise indicated, the reagents used in this method are of analytical
pure, the water is level I water as specified in GB/T 6682.
3.1.1 n-butanol (CH3CH2CH2CH2OH).
3.1.2 Potassium ferricyanide [K3Fe (CN)6].
3.1.3 Sodium hydroxide (NaOH).
3.1.4 Hydrochloric acid (HCl).
3.1.5 Sodium acetate (CH3COONa • 3H2O).
3.1.6 Glacial acetic acid (CH3COOH).
3.1.7 Methanol (CH3OH). Chromatographic pure
5.1.3 Other solid samples with lower moisture content. for example, the grain
having a moisture content at about 15%, TAKE about 100 g of sample, USE
determination in time or PRESERVE it in refrigerator.
5.2 Preparation of specimen solution
5.2.1 Test solution extraction
WEIGH 3 g ~ 5 g (accurate to 0.01 g) of solid sample or 10 g ~ 20 g of liquid
sample, PLACE it into a 100 mL conical flask (with a soft stopper), ADD 60 mL
of 0.1 mol/L hydrochloric acid solution, SHAKE it uniformly, PLUG the soft
stopper, PLACE it in the autoclave at 121 °C for 30 min. After finishing
hydrolysis and cooling it to below 40 °C, TAKE it out, SHAKE it gently for several
times; USE the pH indicator, USE 2.0 mol/L sodium acetate solution to adjust
adjusted based on different enzyme activity) of mixed enzyme solution, SHAKE
it uniformly; PLACE it in an incubator at 37 °C for overnight (about 16 h);
TRANSFER all the enzyme solution into a 100 mL volumetric flask, USE water
to make its volume reach to the mark, SHAKE it uniformly, CENTRIFUGE or
FILTER it, TAKE the supernatant to prepare for use.
5.2.2 Test solution derivatization
Accurately PIPETTE 2.0 mL of supernatant or filtrate into a 10 mL test tube,
ADD 1.0 mL of alkaline potassium ferricyanide solution, VORTEX it uniformly,
accurately ADD 2.0 mL of n-butanol, VORTEX it again to mix it uniformly for 5
stratified, ABSORB the n-butanol phase (upper layer), USE a 0.45 μm organic
microporous membrane to filter it, TAKE 2 mL of filtrate and PLACE it into a 2
mL brown sample vial to prepare for analysis. If the concentration of vitamin B1
in the test solution exceeds the maximum concentration in the linear range, it
shall take the supernatant to dilute it for several times for re- derivatization, AND
make sample injection again.
TAKE another 2.0 mL of standard series working solution, MAKE it subject to
derivatization synchronously with the test solution.
Note 1. Derivatives are stable within 4 h at room temperature.
environment.
Note 3. As for the dried pepper and other samples, when the extract is
determined after direct derivatization, the recovery rate of vitamin B1 is relatively
low. After the extract is purified by the artificial zeolite, the recovery rate of the
c - The concentration of vitamin B1 calculated from the standard curve of the
test solution (extract), in micrograms per milliliter (μg/mL);
V - Test solution (extract) constant volume, in milliliters (mL);
f - Dilution factor of test solution (supernatant) before derivatization;
m - Mass of the specimen, in grams (g).
independent determinations obtained under repeatability conditions, the result
is retained with three significant figures.
Note. The measured thiamine content determined in the specimen is multiplied
by the conversion factor of 1.121, to obtain the content of thiamine
hydrochloride.
7 Precision
The absolute difference between two independent determinations obtained
under repeatability conditions shall not exceed 10% of the arithmetic mean.
8 Others
volume of this standard method, the detection limit of vitamin B1 in food is 0.03
mg/100 g, the limit of quantitation is 0.10 mg/100 g.
Method 2. Fluorescence spectrophotometry
9 Principles
Thiamin is oxidized to thiopyrimidine in alkaline potassium ferricyanide solution,
under the irradiation of ultraviolet light, the thiopyrimidine fluoresces. Under the
given conditions where there is no interference from other fluorescent
substance, the intensity of this fluorescence is proportional to the amount of
thiopyrimidine amount, i.e., proportional to the amount of thiamine in solution.
treat it to separate the thiamine from the impurities, then use the obtained
solution for determination.
Purification of the sample extract. Accurately ADD 20 mL of the above extract
into the salt-based exchange column (or chromatographic column), so that the
total amount of thiamine of the active artificial zeolite is about 2 μg ~ 5μ g, at a
flow rate of about 1 drop/s. ADD 10 mL of ne...
   
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